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首頁(yè) 新聞動(dòng)態(tài) 文章詳情

助力科研,全式金點(diǎn)突變?cè)噭┖蠪M111榮登Cell

文章信息

文章題目:ABLs and TMKs are co-receptors for extracellular auxin

期刊:Cell

發(fā)表時(shí)間:2023年11月17日

主要內(nèi)容:福建農(nóng)林大學(xué)徐通達(dá)團(tuán)隊(duì)和楊貞標(biāo)團(tuán)隊(duì)在Cell雜志上發(fā)表了文章ABLs and TMKs are co-receptors for extracellular auxin,該研究發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)新的質(zhì)外體定位的生長(zhǎng)素結(jié)合蛋白,ABL1(ABP1-like protein 1)和ABL2,其與生長(zhǎng)素結(jié)合蛋白ABP1具有相似結(jié)構(gòu),在細(xì)胞膜上形成ABP1/ABLs-TMK生長(zhǎng)素共受體感受并傳遞胞外生長(zhǎng)素信號(hào),調(diào)控植物生長(zhǎng)和發(fā)育的分子機(jī)制。

原文鏈接:https://doi.org/10.1016/j.cell.2023.10.017

使用TransGen產(chǎn)品:

Fast Mutagenesis System (FM111)


圖1-調(diào)整后.png


研究背景

植物合成的生長(zhǎng)素小分子通過(guò)體內(nèi)的極性運(yùn)輸系統(tǒng),進(jìn)行細(xì)胞間的傳遞,最終在特定的組織器官中發(fā)揮作用。在此過(guò)程中,胞外生長(zhǎng)素含量的動(dòng)態(tài)變化誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生快速的胞質(zhì)響應(yīng),最終調(diào)控細(xì)胞極性建成和分化等生物學(xué)過(guò)程。半個(gè)多世紀(jì)以來(lái),植物細(xì)胞如何感受和響應(yīng)胞外生長(zhǎng)素信號(hào),及其引發(fā)的信號(hào)傳遞級(jí)聯(lián)反應(yīng)分子機(jī)制仍然不清楚。

前期研究發(fā)現(xiàn)類受體跨膜激酶TMK家族作為生長(zhǎng)素信號(hào)傳遞的關(guān)鍵組分,通過(guò)磷酸化修飾調(diào)控一系列下游底物活性,但生長(zhǎng)素如何激活TMK信號(hào)通路知之甚少。生長(zhǎng)素促進(jìn)質(zhì)外體定位的ABP1與TMK激酶胞外域形成細(xì)胞膜生長(zhǎng)素感知復(fù)合體,但模式植物擬南芥中ABP1在序列上沒(méi)有同源基因,abp1突變體生長(zhǎng)發(fā)育表型不明顯,使得ABP1是否是生長(zhǎng)素的受體一直備受爭(zhēng)議。且TMK激酶是否及如何直接感受胞外生長(zhǎng)素信號(hào)仍未得到解析。


文章概述

首先,研究團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了擬南芥ABP1生長(zhǎng)素結(jié)合位點(diǎn)突變形式的ABP1-5轉(zhuǎn)基因植株,表型分析發(fā)現(xiàn)其與tmk突變體類似,呈現(xiàn)明顯的生長(zhǎng)發(fā)育和生長(zhǎng)素快速響應(yīng)缺陷,暗示ABP1-5蛋白可能通過(guò)對(duì)其他質(zhì)外體定位的,生長(zhǎng)素結(jié)合蛋白產(chǎn)生顯性負(fù)效應(yīng),參與TMK介導(dǎo)的生長(zhǎng)素信號(hào)通路。由于ABP1沒(méi)有同源基因,為了尋找其他的生長(zhǎng)素結(jié)合蛋白,研究者通過(guò)檢索TMK1互作蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù),鑒定到兩個(gè)新的生長(zhǎng)素結(jié)合蛋白,其與ABP1氨基酸序列相似性偏低,但結(jié)構(gòu)類似,且具有高度保守的生長(zhǎng)素結(jié)合區(qū)域,將其命名為ABL1(ABP1-like protein 1)和ABL2。隨后進(jìn)一步通過(guò)生化分析,發(fā)現(xiàn)ABL1蛋白定位于質(zhì)外體,與ABP1類似,生長(zhǎng)素能夠快速誘導(dǎo)ABL1、ABL2和TMK胞外域的相互作用(1 min)。基于以上結(jié)果,研究者提出了科學(xué)假設(shè)—細(xì)胞膜ABLs-TMK蛋白復(fù)合體感知并傳遞胞外生長(zhǎng)素信號(hào)。

為探索ABLs和ABP1是否存在功能冗余,及是否通過(guò)TMK遺傳互作,調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育和生長(zhǎng)素快速響應(yīng),研究者構(gòu)建了一系列abp1;abls;tmk多重功能缺失突變體和回補(bǔ)材料,表型分析發(fā)現(xiàn):ABL1/2與ABP1的功能具有冗余性,但又有別于ABP1,差異性調(diào)控植物的生長(zhǎng)發(fā)育;ABL1/2與ABP1都通過(guò)協(xié)同TMK家族,介導(dǎo)生長(zhǎng)素的快速響應(yīng)。最后進(jìn)一步通過(guò)微量熱泳技術(shù)(MST)分析顯示,與ABP1類似,ABL1和TMK1胞外域都能特異性的結(jié)合IAA和NAA等活性形式的生長(zhǎng)素分子。有趣的是,當(dāng)TMK1胞外域存在的情況下,ABP1和ABL1對(duì)生長(zhǎng)素的結(jié)合能力顯著增強(qiáng),表明了ABP1/ABLs和TMK在結(jié)合生長(zhǎng)素方面存在協(xié)同作用。


圖2-調(diào)整后.png

ABP1/ABLs-TMKs共受體感知和傳遞胞外生長(zhǎng)素信號(hào)的工作模型圖


綜上,該研究為長(zhǎng)期懸而未決的科學(xué)問(wèn)題—植物細(xì)胞如何感受胞外生長(zhǎng)素信號(hào)提供了分子解釋,揭示了細(xì)胞膜ABP1/ABLs-TMKs生長(zhǎng)素共受體傳遞生長(zhǎng)素信號(hào)調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育的分子機(jī)制,是植物激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)領(lǐng)域的重要發(fā)現(xiàn),為進(jìn)一步解析生長(zhǎng)素復(fù)雜多樣的生物學(xué)功能提供了新的視角,對(duì)高產(chǎn)高效農(nóng)作物分子育種和遺傳改良具有重要指導(dǎo)意義。


全式金產(chǎn)品支撐

優(yōu)質(zhì)的試劑是科學(xué)研究的利器。全式金的點(diǎn)突變?cè)噭┖?em>Fast Mutagenesis System (FM111) 助力本研究。

Fast Mutagenesis System (FM111)

本產(chǎn)品以甲基化的質(zhì)粒為模板,采用部分重疊引物 (均含突變點(diǎn)) 設(shè)計(jì),具有突變效率高,操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。自上市以來(lái)備受客戶喜愛(ài),多次榮登Cell、Science等知名期刊。

產(chǎn)品特點(diǎn):

  由于采用部分重疊引物 (均含突變點(diǎn)) 設(shè)計(jì),使PCR呈指數(shù)擴(kuò)增, 擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳可見(jiàn),擴(kuò)增產(chǎn)物為環(huán)狀,易于轉(zhuǎn)化高。

  使用2×TransStart? FastPfu Fly PCR SuperMix擴(kuò)增,縮短了擴(kuò)增時(shí)間,同時(shí)提高了擴(kuò)增的保真性。

  利用體外限制性內(nèi)切酶和體內(nèi)感受態(tài)細(xì)胞降解甲基化質(zhì)粒模板,突變效率更高,對(duì)照突變效率高達(dá)90%。

全式金產(chǎn)品再一次登上Cell期刊,證明了大家對(duì)全式金產(chǎn)品品質(zhì)和實(shí)力的認(rèn)可,也完美詮釋了全式金一直以來(lái)秉承的“品質(zhì)高于一切,精品服務(wù)客戶”的理念。全式金始終在助力科研的道路上砥礪前行,希望未來(lái)能與更多的科研工作者并肩奮斗,用更多更好的產(chǎn)品持續(xù)助力科研。

 

使用Fast Mutagenesis System (FM111)產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:

?   Yu X Q, Tang W X, Lin W W, et al. ABLs and TMKs are co-receptors for extracellular auxin [J]. Cell, 2023.

?   Wang X, Wang Y, Cao A, et al. Development of cyclopeptide inhibitors of cGAS targeting protein-DNA interaction and phase separation[J]. Nature Communications, 2023.

?   Wang K, Zhang Z W, Hang J, et al. Microbial-host-isozyme analyses reveal microbial DPP4 as a potential antidiabetic target [J]. Science, 2023.

?   Tian Y, Chen Z H, Wu P, et al. MIR497HG-Derived miR-195 and miR-497 Mediate Tamoxifen Resistance via PI3K/AKT Signaling in Breast Cancer [J]. Advanced Science, 2023.

?   Liu X Q, Liu Z P, Wu Z M, et al. Resurrection of endogenous retroviruses during aging reinforces senescence[J].Cell, 2023.

?   Shi S, Ma B, Sun F, et al. Zafirlukast inhibits the growth of lung adenocarcinoma via inhibiting TMEM16A channel activity[J]. Journal of Biological Chemistry, 2022.

?   Chen Y G, Li D S, Ling Y, et al. A Cryptic Plant Terpene Cyclase Producing Unconventional 18-and 14-Membered Macrocyclic C25 and C20 Terpenoids with Immunosuppressive Activity [J]. Angewandte Chemie International Edition, 2021.

?   Yang Y, Csakai A, Jiang S, et al. Tetrasubstituted imidazoles as incognito Toll-like receptor 8 a (nta) gonists[J]. Nature Communications, 2021.

?   Liu M, Xu B, Ma Y, et al. Reversible covalent inhibitors suppress enterovirus 71 infection by targeting the 3C protease[J]. Antiviral Research, 2021.



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